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擔體和固定液的要求及其形態(tài)結構介紹

更新時間:2021-01-26      點擊次數(shù):3610
   擔體和固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”,即固定液的性質與被分離組分之間的某些相似性,如官能團、化學鍵、極性、某些化學性質等,性質相似時,兩種分子間的作用力就強,被分離組分在固定液中的溶解度就大,分配系數(shù)大,因而保留時間就長;反之溶解度小,分配系數(shù)小,因而能很快流出色譜柱。
 
  擔體和固定液的要求:
  1、揮發(fā)性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失。
 
  2、熱穩(wěn)定性好,操作溫度下不發(fā)生分解和聚合反應,并且液體狀態(tài),保持固定液原來的特性。
 
  3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用。
 
  4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點相近或者性質相似的不同物質有盡可能高的分離能力。
 
  5、化學穩(wěn)定性好,不與被測組分,擔體,載氣發(fā)生化學反應。
 
  擔體和固定液在于保存細胞和組織的原有形態(tài)結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質內部結構發(fā)生改變,從而使酶失活。固定劑對細胞核細胞外成分發(fā)生物理改變。
  固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。組織細胞固定液主要由優(yōu)質PFA、磷酸鹽、DEPC處理水組成,pH為7.4,適合于絕大多數(shù)組織和細胞的固定,尤其適用于與RNA有關實驗,它能較好的保護組織和細胞的形態(tài)結構以及RNA。
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